血液安全之核酸检测

作者:检验科 2022-12-26 208 0 0

​首先,我们了解一下生物体的结构:除病毒外,绝大部分生物体是由细胞构成的,也就是说细胞是生物体结构和功能的基本单位。生物所特有的重要大分子是核酸与蛋白质,而核酸是一切生物细胞的基本成分。核酸广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内,生物体内的核酸常常与蛋白质结合形成核蛋白。根据化学组成不同,核酸可分为核糖核酸(简称RNA)和脱氧核糖核酸(简称DNA),不仅扮演者生物体遗传信息的携带者和传递者的角色,还在生物体的生长、发育、繁殖、遗传及变异等重大生命现象中起着主宰作用。核酸是由许多核苷酸聚合而成的生物大分子化合物,其基本结构单位核苷酸。组成核苷酸的基本组分是含氮碱基、戊糖和磷酸:对于RNA来说,含氮碱基是腺嘌呤(A)、尿嘧啶(U)、胞嘧啶(C)、鸟嘌呤(G),对于DNA来说,含氮碱基是A、胸腺嘧啶(T)、C、G;戊糖——RNA是核糖、DNA是脱氧核糖。通常来讲,RNA是单链,局部可形成双螺旋结构,DNA是双螺旋结构。

目前,常规核酸检测多采用聚合酶链式反应(PCR)技术,即在体外模拟自然DNA复制过程的核酸扩增技术,亦称为无细胞分子克隆技术。PCR反应体系五要素分别是:模板、特异性引物、耐热性DNA聚合酶、底物dNTP、含有Mg2+的缓冲液和合适的酸碱度 。PCR反应时DNA的双链就像我们衣服上的拉链一样在高温时拉开,温度降低时拉链在拉锁的带动下又合上,不同的是,再次合上的另一条链不再是先前的那条链而是重新组队的新链(如图1-3所示。如此这般,经过30次生物体外的特殊DNA复制,可以得到约10亿条DNA链。

血液安全之核酸检测

图1  模板DNA的变性

血液安全之核酸检测

图2  模板DNA与引物的退火(复性)

血液安全之核酸检测

图3  引物的延伸

检验科  王艺芳


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